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伯樂CFX DUET是一款非常精密的光學檢測儀器,為了確保實驗結果的準確性、穩定性和可重復性,在工作中必須遠離一些可能對其產生干擾的儀器。核心原則是:避免電磁干擾、振動干擾和氣溶膠污染。以下是需要遠離的儀器類別和具體說明:
一、伯樂CFX DUET實時熒光定量PCR儀產生強烈電磁干擾的儀器
這類儀器是qPCR儀的“頭號天敵",因為它們會嚴重干擾qPCR儀內部精密的電路、信號傳輸和探測器工作,導致信號不穩定、數據跳動(曲線毛刺多)甚至儀器故障。1
1、離心機:
(1)危害: 尤其是高速離心機和超速離心機在啟動、加速和停止時會產生巨大的瞬時電流和電磁場。
(2)建議: 不要與qPCR儀共用同一個電路插座或排插。 將離心機放置在遠離qPCR儀的另外一個實驗臺或房間。如果必須在同一房間,保持至少2-3米的距離,并確保電源分開。
2、大功率微波爐/電磁爐:
(1)危害: 工作原理就是強大的電磁場,干擾性強。
(2)建議: 實驗室嚴禁放置此類設備。如果附近房間有,也需留意。
3、大型制冷設備:
(1)危害: 如-80°C超低溫冰箱、大型4°C冷藏柜的壓縮機在啟動和運行時會產生電磁干擾和振動。
(2)建議: 盡量不要將qPCR儀緊靠著這些冰箱放置。保持一定距離。
4、渦旋振蕩器、磁力攪拌器:
(1)危害: 雖然功率小,但電機工作也會產生高頻率的電磁干擾。
(2)建議: 不要在qPCR儀正在運行時,在其旁邊使用這些設備。加樣準備階段可以,但運行時關閉或移開。
5、其他大型電機設備:
危害: 如真空泵、搖床、大型水浴鍋等。
二、伯樂CFX DUET實時熒光定量PCR產生強烈振動的儀器
振動會影響qPCR儀內部光學元件的精準對位,可能導致熒光信號采集不準,影響Ct值的重復性。
1、離心機(再次強調): 離心機,特別是轉子不平衡時,會產生巨大振動。
2、搖床/振蕩培養箱: 運行時是持續的振動源。
3、真空泵: 工作時振動非常明顯。
4、大型空調或通風系統的外機: 如果安裝在附近,其振動會通過實驗臺面傳遞。
5、建議: 將qPCR儀放置在堅固、平穩、獨立的實驗臺面上,遠離這些振動源。必要時可以使用防震臺。
三、伯樂CFX DUET實時熒光定量PCR產生氣溶膠污染的儀器
這是從樣本純度和實驗交叉污染角度考慮。
1、高速離心機:
危害: 在打開離心管蓋的瞬間,極易產生氣溶膠,如果其中含有DNA/RNA模板或PCR產物,會污染您的qPCR反應體系,導致假陽性。
建議: 樣本制備區(尤其是核酸提取和加樣區)必須與qPCR擴增/檢測區在空間上分開。 qPCR儀應該放置在干凈的“擴增區"或“檢測區",這個區域內不應該進行任何形式的樣本開蓋、核酸提取等操作。
2、渦旋振蕩器:
危害: 劇烈渦旋混合開蓋或管蓋不緊的樣本管時,會產生氣溶膠。
建議: 所有可能產生氣溶膠的操作都應在樣本準備區進行,切勿在qPCR儀旁邊進行。
四、總結與實踐建議
1、分區操作是金標準: 嚴格遵守實時熒光定量PCR實驗室的“四區原則"(試劑準備區、樣本制備區、擴增區、產物分析區)。CFX DUET必須放置在擴增區。這個區域應該是“干凈"的,只放置qPCR儀和電腦,不進行任何樣本處理。
2、電源: 為CFX DUET配備一個專用的墻壁插座或一個干凈的、不帶任何其他大功率設備的電源排插。
3、穩定的實驗臺面: 將儀器放在平穩、無振動的位置。
4、良好的散熱環境: 周圍預留空間,遠離熱源,保持通風。
5、保持清潔: 定期清潔樣品槽和外殼,防止灰塵和污染物影響。
簡單來說,請將您的伯樂CFX DUET想象成一位正在聽微弱心跳聲的醫生。您需要為他創造一個安靜(無電磁干擾)、穩定(無振動)、干凈(無污染)且涼爽(散熱良好)的環境,他才能做出最準確的診斷。