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選擇伯樂(Bio-Rad)CFX Opus 96 實時熒光定量PCR儀時,需要重點關注以下關鍵參數和特性,以確保它能滿足您的實驗需求和預算。可以將這些參數分為三個核心維度:硬件性能、光學檢測系統、軟件與合規性。
一、伯樂CFX Opus96實時熒光定量PCR儀硬件性能參數
1、樣品通量與模塊類型:
(1)96孔:標準配置,一次最多運行96個樣本(或更多,如果使用雙模塊版)。需確認是標準96孔板還是低容板(如96-well twin.tec),后者可減少試劑消耗。
(2)模塊可更換性:CFX Opus 96的亮點之一是模塊可互換。您可以根據實驗需要,快速更換不同的模塊(例如,從標準96孔模塊換到384孔模塊)。這極大地擴展了儀器的靈活性。因此,需要關注模塊的兼容性與價格。
2、溫控系統:
(1)升降溫速率:通常 > 4-5°C/秒。更高的速率可以縮短循環時間,提高效率。
(2)溫度均一性:這是QPCR數據可靠性的關鍵。伯樂的帕爾貼溫控技術和的散熱設計(如右側散熱)保證了出色的孔間溫度均一性(通常宣稱在±0.1°C以內)。查看其溫度梯度功能的性能,可用于優化退火溫度。
(3)熱蓋溫度:可調熱蓋(通常可達105-110°C),能有效防止頂部冷凝,尤其適用于低反應體積。
二、伯樂CFX Opus96實時熒光定量PCR儀
1、激發與檢測通道:
(1)通道數量:CFX Opus 96標準配置為4通道+1參比通道。這意味著單次運行最多可同時檢測4種不同的熒光染料(如FAM, HEX/VIC, ROX/Texas Red, Cy5)。
(2)光源:采用長壽命LED作為激發光源,取代了傳統的鹵鎢燈,更穩定、壽命更長(宣稱>20,000小時)、無需預熱。
(3)檢測器:高靈敏度光電二極管。關注其靈敏度(可檢測低拷貝模板的能力)和動態范圍(通常可跨越10個數量級)。
2、濾光片系統:
(1)濾光片配置:檢查每個通道對應的激發/發射濾光片波段,確保與您常用的熒光染料(如SYBR Green, TaqMan探針等)匹配。伯樂的儀器通常預設了優化的濾光片組。
(2)多色檢測能力:對于多重qPCR,優異的通道串擾控制和光譜校正功能至關重要。確保儀器軟件有強大的多組分校正功能。
三、伯樂CFX Opus96實時熒光定量PCR儀軟件與合規性參數
1、操作軟件:
(1)CFX Maestro軟件:這是配套的核心軟件。評估其用戶界面是否直觀、實驗設置流程是否便捷(如創建板布局、定義探針/染料)、數據分析工具是否強大(如自動基線閾值設定、多種定量方法、熔解曲線分析、基因表達分析等)。
(2)云連接與遠程監控:CFX Opus系列支持云連接,可以通過手機或電腦遠程監控實驗進度、接收完成通知,非常方便。
2、合規性與驗證:
(1)21 CFR Part 11合規性:如果您的實驗室需要滿足FDA的電子記錄和電子簽名法規(如在制藥、臨床診斷領域),務必確認儀器和軟件提供相應的合規性選件包。
(2)性能驗證工具:儀器是否提供或推薦配套的驗證試劑盒(如已知濃度梯度的DNA模板),用于定期驗證儀器的精度、準確度和線性范圍。
(3)數據導出格式:能否方便地導出為通用格式(如.csv, .xlsx),以便用其他軟件(如GraphPad Prism)進行進一步統計分析。
四、總結與選購建議
關鍵參數核查清單:
1、基礎需求:模塊類型(96孔/384孔?是否可換?)、4色檢測通道是否夠用?
2、性能核心:溫控均一性數據、光學系統靈敏度(尤其對弱表達基因)、多重檢測的串擾水平。
3、操作體驗:CFX Maestro軟件易用性、是否支持遠程監控。
4、長期合規:是否需要21 CFR Part 11功能?售后驗證支持如何?
5、性價比:除了主機價格,還需考慮:可選模塊的價格、軟件升級費用、保修期限和服務合同。