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Bio-Rad伯樂CFX DUET實時熒光定量PCR系統可以進行24小時連續運行。
實際上,這正是實時熒光定量PCR儀的設計用途之一。許多標準的qPCR程序,從加樣、升降溫循環到最終數據分析,本身就需要2到4個小時。對于一些復雜的程序(如高分辨率熔解曲線分析)或反應體系優化不佳導致需要更長循環時間的情況,運行時間超過5-6小時也很常見。因此,儀器在設計時就已經考慮到了長時間穩定運行的需求。以下是關于CFX DUET進行24小時運行的詳細說明和注意事項:
一、伯樂CFC DUET實時熒光定量PCR系統支持24小時運行的特性:
1、穩定的溫控系統:CFX DUET采用帕爾貼熱電溫控技術,能夠在長時間的循環過程中保持精確和穩定的溫度控制,確保反應的特異性和效率。
2、可靠的硬件設計:其光學檢測系統和電子元件都經過嚴格測試,能夠保證在持續工作下的可靠性。
3、軟件支持:CFX Maestro軟件允許用戶設置長時間、復雜的擴增程序,并且可以在運行結束后自動保存數據并關機,支持無人值守的運行模式。
二、伯樂CFX DUET實時熒光定量PCR系統進行長時間運行時的重要注意事項:
1、儀器放置環境:
(1)電源:確保連接到一個穩定、不間斷的電源。避免使用經常跳閘或電壓不穩的電路。如果條件允許,可以考慮使用UPS(不間斷電源)以防萬一。
(2)通風:儀器周圍必須留有足夠的散熱空間(建議左右和后側至少保留10-15厘米的空隙)。不要將其放置在密閉空間或靠近熱源的地方。
(3)清潔:保持儀器所在環境的清潔,避免灰塵堵塞風道,影響散熱。
2、實驗前的準備:
(1)反應板密封:這是至關重要的一步。務必使用光學級封板膜,并確保將其密封嚴實,防止在長時間運行過程中反應液蒸發,這會導致孔間濃度不均、熒光值異常,甚至實驗失敗。
(2)程序驗證:在正式進行長時間運行前,先用一個短程序測試一下您的實驗體系和儀器狀態是否正常。
(3)耗材質量:使用高質量的96孔板或8聯管,確保其與儀器的熱蓋接觸良好,能有效壓迫液面,防止蒸發。
3、運行期間:
(1)雖然可以無人值守,但建議在程序開始運行一段時間后(例如,一個循環結束后)通過軟件遠程檢查一下儀器的狀態和擴增曲線是否正常。
(2)確保實驗室門禁或管理不會導致您在需要時無法進入實驗室處理后續事宜。
三、總結
Bio-Rad CFX DUET有能力且被設計用于進行24小時或更長時間的連續運行。 只要您確保電源穩定、散熱良好,并且在實驗準備階段(特別是封板)做好,就可以放心地讓儀器自動完成實驗。
如果您計劃進行的是極其關鍵或珍貴的樣本實驗,進行一個預實驗來驗證整個流程的穩定性總是一個好習慣。