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技術文章

BioRad伯樂CFX Opus 96實時熒光定量PCR儀可以做的實驗有哪些?

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伯樂(Bio-Rad)的 CFX Opus 96 是一款高性能、高通量的實時熒光定量PCR儀。核心功能是進行qPCR 實驗,但憑借其精確的溫控、靈敏的光學檢測系統和靈活的軟件,它可以完成多種基于PCR實驗。以下是CFX Opus 96可以進行的主要實驗類型,從常見到專業的:


一、伯樂CFX Opus 96實時熒光定量PCR儀基礎應用

1、基因表達分析

這是廣泛的應用。 通過檢測樣本中特定mRNA的量,來研究基因在何種條件下、在哪些組織或細胞中表達。

應用實例:研究癌癥組織中某個癌基因的表達是否上調;比較藥物處理前后細胞中炎癥因子基因的表達變化。

2、病原體檢測與鑒定

高靈敏度和特異性使其成為檢測病毒、細菌、真菌等病原體的黃金標準。

應用實例:新冠病毒、流感病毒、HPV病毒分型、食品安全中的致病菌檢測等。

3、轉基因成分檢測

定性或定量檢測食品、飼料或植物樣本中是否含有轉基因成分。

4、SNP分型

檢測單核苷酸多態性,用于基因突變分析、藥物基因組學、遺傳病篩查等。通常需要使用特定的探針或染料。


二、伯樂CFX Opus 96實時熒光定量PCR儀高級應用

1、數字PCR

注意:CFX Opus 96本身是一臺qPCR儀。但要進行定量的數字PCR,需要額外配備伯樂的QX200 Droplet Digital PCR系統。流程是:先用QX200系統生成微滴并完成PCR擴增,然后將96孔板放到CFX Opus 96上進行終點熒光檢測,最后通過軟件分析每個微滴的熒光信號,實現定量。所以,它可以作為ddPCR工作流中的一個組成部分。

2、高分辨率熔解曲線分析

CFX Opus 96具有出色的熔解曲線分析功能,可以:

基因分型:區分不同的基因型,如突變型、野生型和雜合型。

突變掃描:檢測PCR產物中是否存在未知的突變或單堿基差異。

甲基化分析:結合重亞硫酸鹽處理,可以用于DNA甲基化水平的研究。

3、microRNA表達分析

由于miRNA分子非常短,需要特殊的莖環法引物或加尾法來進行逆轉錄和qPCR。CFX Opus 96的高靈敏度使其非常適合檢測這種低豐度、小片段的RNA。

4、多重PCR

在一個反應管內同時檢測多個目標基因。這要求儀器具有多個、且光譜不重疊的熒光通道。CFX Opus 96通常配置有3-5個熒光通道,可以輕松進行雙重、三重甚至更多重的qPCR實驗,大大提高效率和節省樣本。


三、總結

伯樂CFX Opus 96 PCR儀的核心能力可以概括為:

1、高精度定量:不僅能判斷“有或無",還能精確知道“有多少"。

2、高靈敏度:可以檢測極微量的核酸樣本。

3、高特異性:通過探針法和熔解曲線分析,確保檢測結果的準確性。

4、高通量:96孔板格式適合中等通量的篩選和驗證實驗。

5、多功能性:通過不同的實驗設計和試劑盒,可以實現從基礎的基因表達到高級的突變分析等多種應用。


在選擇實驗方案時,您需要根據具體的研究目標,搭配相應的試劑盒、引物和探針,并利用CFX Maestro軟件進行實驗設計和數據分析。對于定量的數字PCR,請記住需要配合QX200系統使用。

TEL:18016231680

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