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伯樂(Bio-Rad)CFX Opus 96 實時熒光定量PCR系統是一款非常精密和可靠的儀器。為了確保其長期穩定運行、獲得準確可靠的實驗數據,日常的維護保養至關重要。以下是針對CFX Opus 96的詳細日常維護保養指南,分為 每日/每次使用后、每周/定期 和 深度清潔 三個部分。
一、伯樂CFX Opus 96實時熒光定量PCR儀每日/每次使用后維護
這些步驟應在每次運行完PCR程序后執行,是預防污染和保持儀器性能的基礎。
1、清潔樣品槽模塊
(1)目的: 防止殘留的礦物油、蒸發冷凝物或偶然灑落的樣品污染后續實驗。
(2)步驟:
待儀器冷卻至室溫后,打開機蓋。
使用無塵棉簽或壓縮空氣。
(3)推薦方法: 用無菌水或70%乙醇浸濕無塵棉簽(注意:不要過量滴液,以擠不出液體為宜),輕輕擦拭每個樣品孔的底部和側壁。然后換用干棉簽擦干,或等待其自然蒸發。
(4)替代方法: 使用實驗室專用的壓縮空氣罐,從各個角度吹掃樣品孔,以去除灰塵和纖維。
注意: 嚴禁使用強酸、強堿、高濃度有機溶劑或粗糙的紙巾/布料擦拭,以免刮傷或腐蝕樣品槽表面。
2、清潔儀器外殼和機蓋
(1)目的: 保持外觀整潔,防止外部污染物被帶入儀器內部。
(2)步驟:
用柔軟的濕布蘸取少量中性清潔劑或70%乙醇,擦拭儀器外殼、機蓋(特別是內側)和控制面板。
確保布只是微濕,切勿讓任何液體流入儀器內部或縫隙中。
用干布擦干。
3、檢查并清空廢液槽
(1)目的: CFX Opus 96在運行時會有一個小風扇幫助散熱,可能會在內部產生少量冷凝水,收集在廢液槽中。
(2)步驟:
定期檢查儀器后部或底部的廢液槽(請參考用戶手冊確認具體位置)。
如果發現有液體,及時將其倒掉并清潔干凈。
二、伯樂CFC Opus 96實時熒光定量PCR系統每周/定期維護
如果儀器使用頻率很高,建議每周進行一次。
1、運行背景校正校準
(1)目的: 校準光學檢測系統,確保所有通道(如FAM, HEX, ROX, Cy5等)的基線背景值準確。這對于低豐度基因的準確定量尤其重要。
(2)步驟:
在CFX Maestro軟件中,找到“Instrument"或“Maintenance"選項卡。
選擇運行“Background Calibration"或類似選項。
按照屏幕提示進行操作。注意: 運行校準時,樣品槽必須是空的且保持清潔干燥。
建議每月至少執行一次,或在更換光源、進行重大維修后必須執行。
2、進行光學檢驗
(1)目的: 快速檢查所有LED光源和檢測器是否工作正常。
(2)步驟:
在軟件維護菜單中,選擇運行“Optical Test"。
儀器會快速掃描所有熒光通道。檢查測試結果報告,確認所有通道均通過(PASS)。如果某個通道失敗,請聯系伯樂技術支持。
3、全面清潔和檢查
執行一次比日常更的樣品槽和外殼清潔。
檢查電源線、數據線是否連接牢固,有無破損。
三、深度清潔與特殊情況處理
1、污染物灑落處理
(1)情況: 如果發生PCR反應液或染料灑落到樣品孔中。
(2)措施:
立即停止當前運行的程序(如果正在運行)。
待儀器冷卻后,立即用含10%漂白劑(次氯酸鈉)的棉簽進行初步擦拭,以降解DNA/RNA。
然后用70%乙醇棉簽多次擦拭,以去除漂白劑殘留和有機污染物。
最后用無菌水棉簽擦拭,并用干棉簽擦干。
嚴重污染時,可能需要運行多個空白PCR循環(只加水)以驗證清潔效果。
2、使用去污染液
如果懷疑有氣溶膠或擴增子污染,可以使用商業化的PCR去污染劑(如DNA-OFF™, DNA-Zap™等),按照產品說明書對樣品槽和機蓋內部進行處理。處理后務70%乙醇或無菌水清除去污染劑殘留。
四、維護保養注意事項總結
1、安全重要: 在進行任何清潔維護前,務必關閉儀器電源并拔掉電源插頭(簡單的日常外殼擦拭除外)。待加熱模塊冷卻后再操作,以防燙傷。
2、溫和清潔: 始終使用溫和的清潔劑(70%乙醇、中性清潔劑)。避免使用丙酮、強酸、強堿等腐蝕性溶劑。
3、防止液體進入: 確保清潔工具(布、棉簽)不會滴落液體到儀器內部。
4、使用正確耗材: 始終使用伯樂推薦或認證的96孔板/八聯管和光學封板膜。不匹配的耗材可能導致傳熱不均、密封不嚴或熒光信號異常。
5、環境要求: 將儀器放置在穩固、水平、無震動的臺面上。避免陽光直射、遠離熱源、強磁場和腐蝕性氣體。保持環境清潔,濕度適宜。
6、定期校準: 嚴格遵守推薦的校準周期,這是保證數據準確性的核心。
7、記錄: 建立維護日志,記錄每次維護的日期、內容和發現的問題,便于追蹤和故障排查。