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這是一個非常經典和普及的qPCR平臺,其耗材和試劑生態系統非常成熟??偟膩碚f,您需要準備以下幾大類:
一、賽默飛QuantStudio3實時熒光定量PCR儀核心耗材
1、微孔板
0.2 mL 96孔板:這是常用的格式。有單孔獨立式和8聯排管式。
材質:通常為聚丙烯,確保熱傳導效率和化學兼容性。
選擇建議:
標準板:用于大多數實驗。
光學透明封口膜:必須與板配套使用,密封板子以防止蒸發和污染。有預切割的粘性膜和熱封膜兩種。
8聯排管:靈活性高,適合樣本數量不多的實驗,可以單獨使用每個排管。
2、基座和托架
標準96孔基座:隨儀器標配,用于放置0.2 mL的96孔板或8聯排管。
96孔板透明托架:如果您使用獨立的8聯排管,需要將這個托架放入基座中,以固定排管的位置。
二、賽默飛QuantStudio3實時熒光定量PCR儀核心試劑
1、染料法
染料(如SYBR Green)會嵌入所有雙鏈DNA中發出熒光,成本較低,使用簡便。
推薦賽默飛品牌:
PowerUp™ SYBR™ Green Master Mix:這是目前的主力產品,包含了所有必需組分(熱啟動Taq酶、dNTPs、緩沖液、SYBR Green染料、ROX校正染料等),即開即用,性能穩定。
SYBR™ Select Master Mix:另一款高性能的預混液,同樣包含所有組分。
關鍵點:QuantStudio 3需要使用ROX作為被動參比染料來校正孔與孔之間的熒光信號誤差。上述預混液都已包含ROX,無需額外添加。
2、探針法
使用序列特異性的探針(如TaqMan探針),特異性更高,適合多重檢測。
推薦賽默飛品牌:
TaqMan™ Fast Advanced Master Mix:快速循環預混液,能顯著縮短實驗時間,且包含所有組分。
TaqMan™ Universal Master Mix II:經典的探針法預混液,適用性廣。
關鍵點:除了預混液,您還需要向賽默飛或其它供應商訂購針對您目標基因的特異性TaqMan探針引物套裝。
三、輔助耗材與試劑
1、酶水:用于稀釋引物、配制反應體系。必須是分子生物學級別,無DNA酶、RNA酶。
2、引物:針對您的目標基因設計的特異性引物。
3、模板DNA:您要定量的樣品DNA,通常是反轉錄得到的cDNA(如果是RNA定量)。
4、實驗室通用耗材:
移液器及無菌帶濾芯吸頭:確保精確移液和防止氣溶膠污染。
微型離心機:用于離心混勻反應液。
渦旋振蕩器。
冰盒:用于放置對溫度敏感的試劑。
手套:防止污染。
四、最后建議:
1、新手入門:強烈建議從SYBR Green染料法開始,使用PowerUp™ SYBR™ Green Master Mix 和兼容的96孔板,這是最直接、成本效益高的組合。
2、渠道:訪問賽默飛世爾科技,在搜索框中輸入“QuantStudio 3 consumables"或上述試劑名稱,可以找到最準確的產品列表、說明書信息。