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賽默飛7500實時熒光定量PCR儀是一款在高校生命科學、醫學、農學等研究領域中應用非常廣泛的核心設備。它本身是一個功能強大的“檢測平臺",能夠執行的實驗項目取決于您設計的實驗和使用的試劑。簡單來說,只要實驗的最終目的是對特定核酸(DNA或cDNA)進行精確定量和檢測,都可以使用7500來實現。以下是它在高校中常見的、具體的實驗項目分類和舉例:
一、賽默飛7500實時熒光定量PCR核心應用領域
1、基因表達分析
這是qPCR經典、廣泛的應用。通過檢測樣品中特定基因的mRNA水平(經逆轉錄為cDNA),來研究基因在何種條件下、何種組織中表達。
研究案例:
醫學/生物學: 研究某種藥物處理細胞后,癌基因(如p53)或炎癥因子(如IL-6, TNF-α)的表達變化。
植物學: 研究植物在干旱、鹽堿脅迫下,相關抗逆基因的表達模式。
發育生物學: 分析不同胚胎發育階段關鍵調控基因的表達量差異。
2、微生物檢測與鑒定
利用物種特異性的引物探針,對微生物進行定性和定量分析。
研究案例:
環境科學: 檢測水體或土壤中特定功能微生物(如硝化細菌、降解石油的細菌)的豐度。
食品科學: 快速檢測食品中的致病菌,如沙門氏菌、李斯特菌。
醫學基礎研究: 分析腸道微生物群落中某種特定菌群的比例變化。
3、在轉基因作物或動物的研究中,用于確認外源基因是否成功整合并進行表達。
研究案例:
農學: 檢測轉基因大豆、玉米中特定外源基因(如抗蟲Bt基因)的拷貝數和表達水平。
生物技術: 在構建轉基因小鼠模型后,鑒定其基因型。
4、微小RNA(miRNA)表達分析
miRNA是重要的基因調控因子。由于其片段短,需要特殊設計的莖環法引物進行逆轉錄和檢測,qPCR是研究其表達的金標準方法。
研究案例:
癌癥研究: 分析腫瘤組織中特定的致癌或抑癌miRNA(如miR-21, let-7家族)的表達水平,作為潛在的生物標志物。
5、病毒載量定量
精確測定患者血清或細胞培養物中病毒的拷貝數,是病毒學研究和新藥評估的關鍵。
研究案例:
醫學/病毒學: 研究抗病物對乙肝病毒(HBV)、丙肝病毒(HCV)或單純皰疹病毒(HSV)復制的影響。
二、7500實時熒光定量PCR實驗技術類型
在7500上,這些應用通常通過以下幾種技術模式實現:
1、SYBR Green染料法:
原理: 染料非特異性地嵌入雙鏈DNA,發出熒光。
優點: 成本低,使用方便。
缺點: 特異性稍差,容易受非特異性擴增和引物二聚體影響。
適用項目: 快速的基因表達篩查、基因型鑒定(配合熔解曲線分析)。
2、TaqMan探針法:
原理: 使用一個序列特異性的熒光探針,特異性高,準確性好。
優點: 特異性高,適合多重PCR。
缺點: 探針合成成本較高。
適用項目: SNP分型、病原體定量、多重基因表達分析。
三、總結
總而言之,賽默飛7500實時熒光定量PCR儀在高校實驗室中是一個通用型核酸定量工具。它可以服務于:
1、基礎生物學研究(基因功能、信號通路)
2、醫學研究(疾病機制、生物標志物、藥物靶點)
3、農學研究(作物育種、抗逆機理)
4、環境科學研究(微生物生態)
5、食品科學(安全檢測)
最終決定它能檢測什么項目的,是您的研究課題、實驗設計和所使用的引物/探針。 在開始實驗前,請務必查閱相關領域的實驗方案,并完成引物探針的優化與驗證。